1、什么是胎牛血清?
胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)指通過(guò)對(duì)未出生的胎牛行穿刺采血,再經(jīng)自然層析、離心、三級(jí)0.1μm微濾等處理而得到的上清液。
2、胎牛血清的生產(chǎn)流程
首先甄選符合要求的高質(zhì)量的供體,將胎牛從母體內(nèi)取出,對(duì)胎牛進(jìn)行穿刺取血,采血過(guò)程中要保證無(wú)菌操作,且紅細(xì)胞不可破裂過(guò)多,影響血清質(zhì)量。接下來(lái)冷凍離心,收集血清,凍存,血清解凍后進(jìn)行0.1um三次過(guò)濾,避免病原微生物的污染,此過(guò)程之后會(huì)對(duì)血清進(jìn)行質(zhì)檢和定級(jí),最后全程冷鏈保存和運(yùn)輸。
3、胎牛血清的主要成分
①各種蛋白:白蛋白、球蛋白、纖連蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等;
②因子:各種生長(zhǎng)因子等;
③各種激素:胰島素、促生長(zhǎng)激素、氫化可的松等;
④其他微量元素、維生素、離子等;
⑤不明確的成分:由于胎牛血清是天然生物制品,F(xiàn)BS中還存在部分不明確的生物成分。
4、胎牛血清的主要功能
①提供營(yíng)養(yǎng)胎牛血清中的各種蛋白可提供細(xì)胞分裂所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
②促進(jìn)生長(zhǎng)胎牛血清中的各種生長(zhǎng)因子和激素可促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)
③保護(hù)細(xì)胞胎牛血清帶有一定粘稠度,且有酸堿緩沖液的作用,可保護(hù)細(xì)胞
④提供蛋白酶抑制劑提供蛋白酶抑制劑,中和剩余的胰蛋白酶的消化,保護(hù)細(xì)胞
⑤提供貼壁因子胎牛血清提供貼壁因子,是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子的來(lái)源。
5、胎牛血清使用要點(diǎn)
①正確地儲(chǔ)存胎牛血清應(yīng)在-20°C長(zhǎng)期保存,如在4℃保存,不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月。在使用時(shí)注意分裝使用。避免反復(fù)凍融。
② 正確地解凍 可在4℃冰箱過(guò)夜解凍。推薦使用血清融化三步法:即將500ml血清在室溫下放置1.5h,20℃水浴25min,37℃ 水浴35min。
③正確地使用配制完全培養(yǎng)基盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,并于一周內(nèi)用完。避免胎牛血清在37°C靜置過(guò)久。