今天要聊的話(huà)題，培養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴肯定不會(huì)陌生生：那些讓細(xì)胞健康茁壯成長(zhǎng)的常用試劑——?jiǎng)游镅澹?/span>
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中有點(diǎn)兒像細(xì)胞的“大廚”，它們提供必需的養(yǎng)分、生長(zhǎng)因子和抗體，讓細(xì)胞們可以在培養(yǎng)皿里開(kāi)心地跳舞。那么，不同種類(lèi)的血清到底適用于哪些細(xì)胞培養(yǎng)呢？今天就來(lái)一場(chǎng)“血清全攻略”，一探究竟！
一
血清的概述
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，血清是一種關(guān)鍵的培養(yǎng)輔助物質(zhì)。
它是從血液中提取出來(lái)的液體，血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體（理論上）或指纖維蛋白原已被除去的血漿。
血清的其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和各種生長(zhǎng)因子、結(jié)合蛋白、促接觸和生長(zhǎng)因子，使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
在細(xì)胞培養(yǎng)中，我們通常將血清添加到培養(yǎng)基中，以創(chuàng)造一個(gè)理想的細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。
二
血清的分類(lèi)
動(dòng)物不同，分離出的血清也會(huì)有所不同。
物種來(lái)源相同的血清，根據(jù)采血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類(lèi)別。
有些時(shí)候，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工。
因此，市面上的血清種類(lèi)也越來(lái)越多。
1牛血清
根據(jù)采血時(shí)間的不同，可分為以下幾種：
【胎牛血清】（Foetal Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)FBS）：是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎。【新生牛血清】（Newborn Calf Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS）：0—7天內(nèi)（也有說(shuō)法是0—30天內(nèi)）;
【小牛血清】（Calf Serum）：采自出生30天——1年的小牛。
【成牛血清】（Adult Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)ABS）：采自成年牛收全血后分離得到血清。
合格的血清產(chǎn)品，需要嚴(yán)格控制采血時(shí)間點(diǎn)，才能保證最基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例：
一旦牛胎齡過(guò)長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全，進(jìn)而使制備的血清中含有補(bǔ)體，影響血清品質(zhì)。另外，胎牛中各類(lèi)生長(zhǎng)因子也會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育而逐漸喪失，進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。
實(shí)驗(yàn)不是千篇一律的，根據(jù)不同的需求，有時(shí)候需要對(duì)血清進(jìn)行一些“定制化處理”。
根據(jù)不同品質(zhì)分為以下幾種：
根據(jù)內(nèi)毒素含量不同，血清可以分為不同品質(zhì)：
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí)，此血清為特級(jí)胎牛血清；
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清；
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清；
根據(jù)不同處理分：
透析胎牛血清：透析過(guò)濾去除10000D以下小分子（如次黃嘌呤和胸腺核苷），避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)（例如同位素標(biāo)記特定小分子，并加入到培養(yǎng)體系中，以研究細(xì)胞代謝），也適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選等應(yīng)用。
去外泌體血清：通過(guò)超速離心法或純化柱，去除絕大部分外泌體的血清，適用于外泌體相關(guān)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究。
超低lgG的血清：使用親和層析等工藝，去除IgG，使其水平低于要求值，可用于抗體、病毒和病毒反應(yīng)以及細(xì)胞表面抗原表位相關(guān)研究。
活性炭/葡聚糖處理的血清：可降低血清中類(lèi)固醇激素的濃度，例如雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、T3 和 T4。適用于相關(guān)激素研究的實(shí)驗(yàn)。
2
馬血清
馬血清一般分為兩種：
第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多，適用于蛋白封閉；
第二種馬血清為細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。它經(jīng)過(guò)多次過(guò)濾，祛除了許多大分子蛋白，但保留了血清中促細(xì)胞生長(zhǎng)的活性因子，因而能用于細(xì)胞培養(yǎng)，例如神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中則需要添加馬血清。
優(yōu)質(zhì)的馬血清來(lái)自健康馬血液，為封閉系統(tǒng)內(nèi)無(wú)菌采血過(guò)濾而成，超低內(nèi)毒素，無(wú)溶血，無(wú)異物，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體、噬菌體等。
3
豬血清
豬血清，常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。
在對(duì)細(xì)胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗(yàn)中，《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗(yàn)用液體培養(yǎng)基的組成成分。
并且，《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗(yàn)】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗(yàn)】中需要陰性血清，即優(yōu)質(zhì)的豬血清，血源必然來(lái)自健康動(dòng)物。
1989年左右，也有國(guó)外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清，用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細(xì)胞（見(jiàn)《動(dòng)物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽(yáng)性反應(yīng)》），原因是牛血清中的白蛋白會(huì)干擾非洲豬瘟抗體的檢測(cè)，造成假陽(yáng)性反應(yīng)。
4
其他動(dòng)物源血清
兔血清：
兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集，可用于與 BSA 結(jié)合用作免疫細(xì)胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清[2]。
山羊血清：
多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現(xiàn)，優(yōu)質(zhì)的山羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)[3][4]。
雞血清：
從屠宰供人類(lèi)食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素 B12 的放射性同位素稀釋測(cè)定[5]。
三
如何挑選合適的血清
在選擇血清時(shí)，需要考慮以下因素：
細(xì)胞類(lèi)型：了解你的細(xì)胞類(lèi)型對(duì)選擇合適的血清至關(guān)重要。不同類(lèi)型的細(xì)胞可能需要不同種類(lèi)的血清。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模耗愕难芯磕康囊矔?huì)影響血清的選擇。不同血清可能含有不同的生長(zhǎng)因子和抗體，適合不同類(lèi)型的實(shí)驗(yàn)。
質(zhì)量和來(lái)源：選購(gòu)高質(zhì)量的血清。
為了選擇合適的血清，盡量進(jìn)行小規(guī)模的試驗(yàn)，以確保它能滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求。因此供應(yīng)商能否提供試用很關(guān)鍵。
在細(xì)胞培養(yǎng)中，血清是細(xì)胞健康生長(zhǎng)的關(guān)鍵因素之一。通過(guò)了解不同種類(lèi)的血清和選擇適合你實(shí)驗(yàn)的血清，為科研工作打下基礎(chǔ)。
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